最新研究揭示lncRNA如何調控外泌體的分泌過程
欄目:最新研究動態 發布時間:2019-06-04
lncRNA HOTAIR在促進肝癌細胞外泌體分泌方面的新功能,并為lncRNA在腫瘤細胞生物學中的應用提供了新的理解……

大量研究報道外泌體攜帶lncRNA參與調控腫瘤進程,然而lncRNA是否參與調控外泌體的分泌,還鮮有報道。

今年三月,Dr. Liang Yang等人在雜志《molecular cancer》上發表了一篇題為“Long non-coding RNA HOTAIR promotes exosome secretion by regulating RAB35 and SNAP23 in hepatocellular carcinoma”的文章,揭示了在肝癌發展過程中,長鏈非編碼RNA HOTAIR如何調控外泌體分泌。研究驗證了lncRNA HOTAIR在促進肝癌細胞外泌體分泌方面的新功能,并為lncRNA在腫瘤細胞生物學中的應用提供了新的理解。

背景:最新的證據表明腫瘤細胞在腫瘤發生過程中釋放大量的載物外泌體。外泌體分泌是一個由某些相關分子調控的多步驟過程。長鏈非編碼RNAs(lncRNA)在肝癌細胞(HCC)發展過程中起了重要作用。然而,lncRNA HOTAIR在調控肝癌細胞外泌體分泌中起到的作用尚不清楚。

方法:本研究使用基因集富集分析法(GSEA)分析HOTAIR表達和外泌體分泌相關基因之間的關系。納米顆粒追蹤分析被用于驗證HOTAIR對外泌體分泌的影響。通過透射電鏡觀察HOTAIR過表達后多泡體(MVBs)的轉運,并用共聚焦顯微鏡對突觸體相關蛋白23 (SNAP23)的簇決定子63 (CD63)進行分析。采用共聚焦共定位分析、磷酸化作用分析和解救實驗,評估HOTAIR管控Ras相關蛋白質Rab-35(RAB35)、囊泡相關膜蛋白3(VAMP3)和SNAP23的機制,

結果:我們在HOTAIR高表達組中發現了外泌體分泌相關基因的富集。HOTAIR通過誘導MVB轉運到質膜促進外泌體的釋放。HOTAIR調控RAB35的表達和定位,從而控制對接過程。而且HOTAIR通過影響VAMP3和SNAP23共定位促進融合的最終步驟。此外,我們驗證了HOTAIR通過mTOR信號誘導SNAP23磷酸化。      

結論:本研究驗證了lncRNA HOTAIR在促進肝癌細胞外泌體分泌方面的新功能,并為lncRNA在腫瘤細胞生物學中的應用提供了新的理解。 

技術路線:                                  

1.   HOTAIR的異常表達與外泌體分泌蛋白的相關性

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2.   驗證HOTAIR促進外泌體的分泌

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3.   HOTAIR增強了MVBs向質膜的轉運

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4.   HOTAIR調控RAB35的表達和定位

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5.   HOTAIR誘導 VAMP3 與 SNAP23的轉運

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6.   HOTAIR通過磷酸化SNAP23促進外泌體的釋放

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